癌症一直是生物学研究的热门话题。关于癌症起源，一种主流观点是癌症干细胞(Cancer Stem Cell，CSC)的无限增殖。CSC是肿瘤内肿瘤细胞的一个亚类，具有自我更新和异常分化能力。CSC不仅调控肿瘤的发生、传播和维持，还有助于肿瘤的化疗耐药性和复发。因此迫切需要探索影响生物活性的因素，特别是CSC分化。长链非编码RNA(lncRNA)作为基因表达的调控因子，在CSCs的细胞活性中起着关键作用。然而RNA(特别是lncRNA)的表观遗传调控机制尚未得到广泛探索。

　　N6-甲基腺苷(m6A)可逆修饰在转录后和翻译调控中起着至关重要的作用。m6A修饰对干细胞和癌症干细胞的干性维持和分化具有显著影响。但lncRNA的m6A修饰及其对CSC的影响仍未探索。

　　浙江大学生命科学学院章晓波教授团队对胃癌(GC)患者中分离的胃癌干细胞(GCSCs)和胃癌非干细胞(GCNSCs)的lncRNA m6A修饰差异进行表征，揭示了位点特异性lncRNA PSMA3-AS1和MIR22HG m6A修饰通过增加miRNAs和蛋白质的稳定性，抑制凋亡和促进增殖，从而促进GCSCs的肿瘤发生。

　　标题：Methylated lncRNAs suppress apoptosis of gastric cancer stem cells via the lncRNA-miRNA/protein axis(甲基化的lncRNA通过lncRNA-miRNA/蛋白轴抑制胃癌干细胞的凋亡)

　　时间：2024.4.10

　　期刊：Cellular & Molecular Biology Letters

　　影响因子：IF 8.3 / 1区

　　实验方法：MeRIP-seq、MeRIP-qPCR等

　　研究摘要：

　　背景：长链非编码RNA(lncRNA)在胃癌的肿瘤发生中起着至关重要的作用。然而，lncRNA甲基化对胃癌干细胞(GCSC)的影响尚不清楚。

　　目的：探究lncRNA甲基化在GCSCs中的作用及其对胃癌发生的贡献。

　　方法：

　　通过甲基化RNA免疫沉淀测序(MeRIP-seq)检测胃癌干细胞中lncRNA的N6-甲基腺苷(m6A)水平，并通过MeRIP定量聚合酶链反应(MeRIP-qPCR)进行验证。

　　通过基于单碱基延伸和连接的qPCR扩增(SELECT)检测lncRNA上m6A特异性修饰位点。

　　构建并转染与催化失活的Cas13(dCas13b)融合蛋白的表达甲基转移酶样3(METTL3)质粒，并诱导靶向lncRNA特异性甲基化位点的RNA，获得具有lncRNAs位点特异性甲基化的胃癌干细胞。

　　使用逆转录(RT)-qPCR和Western blot分析处理后的胃癌干细胞的细胞干性(stemness)。

　　结果：

　　PSMA3-AS1和MIR22HG的位点特异性甲基化抑制了GCSCs的细胞凋亡并促进其细胞干性。

　　LncRNA甲基化增强了PSMA3-AS1和MIR22HG的稳定性，通过PSMA3-AS1–miR-411-3p–或MIR22HG–miR-24-3p–SERTAD1轴抑制GCSC的凋亡。

　　甲基化的lncRNAs促进了PSMA3-AS1与EEF1A1蛋白或MIR22HG与LRPPRC蛋白之间的相互作用，稳定了蛋白并抑制细胞凋亡。

　　体内数据显示，甲基化的PSMA3-AS1和MIR22HG触发了GCSCs的肿瘤发生。

　　结论：

　　本研究揭示了lncRNAs位点特异性甲基化在GCSCs肿瘤发生中的必要性，为癌症发展提供了新的见解。

　　研究小结：

　　本研究结果表明，由METTL3和METTL14介导的PSMA3-AS1和MIR22HG甲基化水平在GCSC中显著增加。研究揭示了PSMA3-AS1和MIR22HG的位点特异性m6A修饰抑制了细胞凋亡并促进GCSC干性。LncRNA甲基化增加了PSMA3-AS1和MIR22HG的稳定性，通过PSMA3-AS1–miR-411-3p–AP1G1或MIR22HG–miR-24-3p–SERTAD1轴促进GCSC增殖并抑制其凋亡。同时PSMA3-AS1或MIR22HG甲基化促进了PSMA3-AS1与EEF1A1蛋白或MIR22HG与LRPPRC之间的互作并稳定互作蛋白，从而抑制细胞凋亡并促进了GCSCs增殖。

　　文章摘自网络，侵删

　　推荐阅读：

　　肺癌胸腺转移在化疗期间用银灵合剂能否改善副作用?

　　为什么打升白针效果越来越差了

　　华蟾素胶囊能治疗哪些肿瘤